Точное определение группы крови по системе AB0 абсолютно необходимо для безопасного проведения трансфузий. Определение групповой принадлежности крови по системе AB0 в обязательном порядке проводится всем донорам и реципиентам переливаний. Наиболее достоверные результаты типирования могут быть получены при проведении исследования перекрестным методом. Этот метод позволяет определить основные группы системы AB0 (0(I), A(II), B(III) и AB(IV)), а также редкие подгруппы A2 и A2B (слабая форма антигена A) и особо редкую группу – «бомбейскую кровь», эритроциты которой имеют фенотип h/h (или Oh).
Исследование выполняется на планшете, для него необходимы: растворы цоликлонов (Анти-A, Анти-B и анти AB), растворы стандартных эритроцитов 0(I), A(II), B(III)), шесть стерильных стеклянных палочек и шесть пипеток Пастера. Кроме этого, нужны часы песочные (с временем истекания 5 минут) а также лампа и лабораторный стол. При выполнении анализа необходимо использовать очки, одноразовые перчатки и медицинский халат. Все пробы крови являются потенциально патогенными и обращаться с ними следует особенно осторожно.
Перекрестный метод определения группы крови выполняется в следующей последовательности:
- а) планшет должен быть промаркирован уникальным образом, маркировка должна содержать информацию о ФИО человека, чья проба крови исследуется (в открытом или зашифрованном виде, например, идентификационный номер из базы донорства);
- б) отстоявшийся в пробирке образец разделяют на эритроциты и сыворотку при помощи пипетки, сыворотку переносят в другую пробирку;
- в) в два ряда на планшете размечаются шесть позиций: анти-A, анти-B, анти-AB и 0, A, B;
- г) рядом с метками первого ряда наносятся капли соответствующих цоликлонов;
- д) рядом с метками второго ряда наносятся капли соответствующих стандартных эритроцитов;
- е) рядом с каплями цоликлонов помещаются капли отделенных эритроцитов, по одной на каждый цоликлон;
- ж) рядом с каплями стандартных эритроцитов помещаются капли сыворотки, также по одной на каждый тип эритроцитов;
- з) расположенные рядом капли цоликлонов и исследуемых эритроцитов перемешиваются попарно;
- и) также попарно перемешиваются капли стандартных эритроцитов и исследуемой сыворотки;
- к) в течение пяти минут за смесями ведется наблюдение при медленном покачивании планшета вправо-влево и вперед-назад.
При агглютинации эритроцитов со всеми цоликлонами и ее полном отсутствии со всеми стандартными эритроцитами образец принадлежит к группе крови AB(IV). При агглютинации эритроцитов с цоликлонами анти-B и анти-AB, а сыворотки со стандартными эритроцитами группы A — группа крови образца B(III). Для образцов группы A(II) должна наблюдаться агглютинация с цоликлонами анти-A и анти-AB и со стандартными эритроцитами группы B. Образцы группы крови 0(I) не дают агглютинации с указанными цоликлонами, а агглютинация сыворотки происходит при смешивании со стандартными эритроцитами групп A и B. При наблюдении агглютинации сыворотки исследуемого образца со всеми стандартными эритроцитами он должен быть направлен в специальную лабораторию для проведения исследования на редкие группы крови.
Источник: https://www.kapatel.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi
